白首乌多糖降血脂作用研究

【摘要】  目的研究白首乌多糖抗高血脂的药理作用。方法采用水提醇沉法提取，用Sevag试剂(氯仿∶正丁醇=5∶1)除蛋白精制多糖。将80只昆明种小鼠随机分成5组，即正常对照组、高脂对照组(模型组)、白首乌多糖小、中、大剂量组。测定白首乌多糖对血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)以及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响。结果白首乌多糖高剂量组能显著降低高脂血症大鼠的TC、TG和LDL-C(P<0.01)，并可显著升高HDL-C(P<0.01)。结论白首乌多糖具有降低血清总胆固醇、甘油酯和低密度脂蛋白，提高高密度脂蛋白的能力；白首乌多糖具有降血脂功能，对高脂血症的发生有一定的预防作用。

【关键词】  白首乌； 多糖； 高血脂症； 降血脂中国论文网H8K-x%H:VN

　耳叶牛皮消Cynanchum auriculatum Royle exWight系萝藦科(Asclepiadaceae)马利筋亚科(Ascle-pioideae)鹅绒藤属(Cynanchum linn)植物，又名飞来鹤(《植物名实图考》)，老牛冻(湖南，四川)［1］；在我国资源丰富，山东、江苏有人工栽培，药用其块根；具有补肝肾、强筋骨、益精血、健脾消食、解毒疗疮等功效［1，2］。白首乌总苷对预防动脉粥样硬化斑块形成有一定的意义［3，4］。本实验研究白首乌多糖的降血脂作用。

y/U*j#\5D.J)y}P0　　1  器材

　　1.1  药材与试剂本实验所用白首乌购自江苏滨海，经湖南省药检所方石林教授鉴定为萝摩科植物耳叶牛皮消Cynanchum auriculatum Royle ex Wight，实验用酒精（AR），总胆固醇(TC) 试剂盒(南京建成生物工程研究所)，甘油三酯(TG)试剂盒(南京建成生物工程研究所)， 低密度脂蛋白(LDL-C)试剂盒(南京建成生物工程研究所)， 高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。氯仿、丙酮、乙醚、正丁醇均为分析纯。

　　1.2  动物 中国论文网4uF g"`l1t:zVI

　　昆明种雄性小鼠80只,体质量(20±2)g，长沙市开福区实验动物科技服务部提供,动物合格证号：湘000468。

　　1.3  仪器与设备

"pMR"gY kfU0　　电热恒温干燥箱，202－3AB型，天津市泰斯特仪器有限公司产品；

　　电热恒温水浴锅，DK－98—1A，天津市泰斯特仪器有限公司产品；

~.\iC%ZsQ$W l0　　真空旋转蒸发器，RE 52－99，上海亚荣生化仪器厂产品；

　　抽滤机，SHB－B95型，郑州长城科工贸有限公司产品。总胆固醇(TC) 试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；  

io1x?$L1^^8sE:Q0　　甘油三酯(TG)试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；  中国论文网8Na2{b]vX

d@,?d+v"x2b0　　试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；  

KpzE'qG },Nx{L
@0　　高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；  中国论文网)abM.A8Cg

　　乙醇95%，分析纯AR，长沙安泰精细化工实业有限公司产品； 中国论文网q f:j&c[ t'N't

　　离心沉淀机，LXT－II，上海医用分析仪器厂产品； 

2G:te2o6y"j0　　氯仿，GB 682－89，上海山浦化工有限公司产品； 

3W0U.j;Kp#|"o$P0　　正丁醇，HG3－1012－76，上海山浦化工有限公司产品； 中国论文网2`_[ks2VX^K

2K|ubF6t0　　分析天平，TG328B， 湘仪天平仪器厂产品。

5SV"j7s9I$N\6J0　　2  方法中国论文网%\:M3K1e)b~.E\q9z'S}

　　2.1   白首乌多糖的提取和纯化  

　　采用水提醇沉法提取白首乌多糖。取白首乌粉末于圆底烧瓶中，加入3倍量85%酒精，回流脱脂。将浸提脱脂后的样品，在90℃恒温水浴中热水浸提2 h，过滤后，滤渣在相同条件下重复浸提1次。减压过滤，去除滤渣，合并滤液。将滤液减压浓缩至最小体积。在浓缩后的多糖溶液中加入3倍95％乙醇，经抽滤，真空干燥后得粗多糖。 粗多糖加蒸馏水复溶后经过Sevag试剂(氯仿∶正丁醇=5∶1)除蛋白，连续操作多次，直到完全脱除蛋白为止。脱蛋白后的多糖溶液中加入3倍95％乙醇，沉淀用乙醇、丙酮及乙醚反复洗涤，经抽滤、干燥后得到精制多糖。

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　2.2  动物分组及处理实验分为5组，即：正常对照组、高脂对照组、低剂量白首乌多糖组、中剂量白首乌多糖组、高剂量白首乌多糖组。除基础饲料组(正常对照组)外，其它各组均采用高脂饲料(猪油10％，胆固醇5％，基础饲料75％)喂饲。以每天灌胃量为大鼠体重的2％将白首乌多糖配制成相应浓度的溶液，各剂量组给予白首乌的量是：低剂量组50 mg/kg体质量；中剂量组100 mg/kg体质量；高剂量组200 mg/kg体质量。正常对照组和高脂对照组给予相应体积的蒸馏水，实验期为10 d。

　　2.3   血样采集及预处理

　　喂养结束后，大鼠禁食12 h，摘眼球取血，离心(3 000 r/min，15 min)分离血清，待测。中国论文网7Y7]8sdd

+p\qD1z'Mo#n0　　2.4   测定指标及方法中国论文网5o#~Pb+x F5ZFh[

　　2.4.1  血清总胆固醇(TC)采用酶比色法(CHOD-PAP法)测定。

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|0　　2.4.2  血清甘油三酯(TG)采用酶比色法(GPO-PAP法)测定。中国论文网 w,e;Ij4c/~-P;B

Z0z%V/nUu6E0　　2.4.3  血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)采用聚乙烯硫酸沉淀法测定。

　　2.4.4  血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)采用磷酸钨-镁沉淀法测定。采用UV1800紫外分光光度仪测定数据。

dbY&i8{6fD0　　2.5   实验数据处理实验数据均在LENOVO-compatible PC 机Windows XP系统下采用Excel 2003进行计算和统计学处理，并用T-test来分析组间差异的显著性。结果以±s表示。文字处理软件用Microsoft Word 2003。  中国论文网A XSq?0I

　　3  结果
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pfGI7Z:R!^ Jn0　　见表1。由表1可以看出，高脂对照组的TC、TG和LDL-C显著高于正常对照组(P<0.05)，而HDL-C无变化 (P>0.05)，表示本实验高血脂模型造模成功,说明高脂饲料能够造成小鼠实验性高脂血症；给予低剂量的白首乌多糖对高脂血症大鼠的TG、LDL-C和HDL-C无显著影响(P>0.05)，但可以使TC极显著地降低(P<0.01)；中剂量白首乌多糖组中，TC、TG和LDL-C均显著低于高脂对照组(P<0.05)，HDL-C显著高于高脂对照组(P<0.05)；高剂量组能显著降低高脂血症大鼠的TC、TG和LDL-C(P<0.01)，并可显著升高HDL-C(P<0.01)，且TC及TG与正常对照组之间无显著差异(P>0.05)，HDL-C显著高于正常组(P<0.05)，但LDL-C值与高脂对照组相比有所降低，可仍显著高于正常对照组(P<0.01)。表1  各组大鼠的血清TG，TC，HDL-C，LDL-C 水平（略）
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　　由以上结果可知，白首乌多糖具有降低血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白，提高高密度脂蛋白的能力，因此具有降血脂生理活性，可能对高脂血症的发生有一定的预防作用。

　　4  讨论中国论文网;zz:BD,]&q%C
    
&hW7wwCk_'V4FF0　　采用高脂饲料配方喂食大鼠来诱导其高脂血症，实验结果表明，白首乌多糖能显著降低高脂血症大鼠的TC、TG和LDL-C，升高HDL-C，且高剂量组各项指标之间均无明显差异，说明高剂量的白首乌多糖具有降血脂功能，对高脂血症的发生有一定的预防作用。白首乌多糖能够显著提高高脂血症大鼠的HDL-C／TC水平，说明其对冠心病和动脉粥样硬化有一定的预防作用。中国论文网.oZ&R7e)Y"eoH?

iW4i"v!AS#A6x5R3G0【参考文献】中国论文网`fM:W4X+S5P a
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