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  • 白首乌多糖降血脂作用研究

    2010年8月23日 14:06 作者:lunwenchina
    中国论文网VvNI!I|3gA

    【摘要】  目的研究白首乌多糖抗高血脂的药理作用。方法采用水提醇沉法提取,用Sevag试剂(氯仿∶正丁醇=5∶1)除蛋白精制多糖。将80只昆明种小鼠随机分成5组,即正常对照组、高脂对照组(模型组)、白首乌多糖小、中、大剂量组。测定白首乌多糖对血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)以及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响。结果白首乌多糖高剂量组能显著降低高脂血症大鼠的TC、TG和LDL-C(P<0.01),并可显著升高HDL-C(P<0.01)。结论白首乌多糖具有降低血清总胆固醇、甘油酯和低密度脂蛋白,提高高密度脂蛋白的能力;白首乌多糖具有降血脂功能,对高脂血症的发生有一定的预防作用。中国论文网z8jg7A\5[:}

    中国论文网"`,l i u2\c\1X[

    【关键词】  白首乌; 多糖; 高血脂症; 降血脂中国论文网@ E!Y#sqNZG5T

    @!B)VR S*q0 耳叶牛皮消Cynanchum auriculatum Royle exWight系萝藦科(Asclepiadaceae)马利筋亚科(Ascle-pioideae)鹅绒藤属(Cynanchum linn)植物,又名飞来鹤(《植物名实图考》),老牛冻(湖南,四川)[1];在我国资源丰富,山东、江苏有人工栽培,药用其块根;具有补肝肾、强筋骨、益精血、健脾消食、解毒疗疮等功效[1,2]。白首乌总苷对预防动脉粥样硬化斑块形成有一定的意义[3,4]。本实验研究白首乌多糖的降血脂作用。

    6J"j$Pz)L2t0中国论文网5\$\RM2U H'lK

      1  器材

    vHu!Y5Z0

    )}d"O7I ^0  1.1  药材与试剂本实验所用白首乌购自江苏滨海,经湖南省药检所方石林教授鉴定为萝摩科植物耳叶牛皮消Cynanchum auriculatum Royle ex Wight,实验用酒精(AR),总胆固醇(TC) 试剂盒(南京建成生物工程研究所),甘油三酯(TG)试剂盒(南京建成生物工程研究所), 低密度脂蛋白(LDL-C)试剂盒(南京建成生物工程研究所), 高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。氯仿、丙酮、乙醚、正丁醇均为分析纯。

    h'U XzP$x v%H0中国论文网8DOa }(i&Ts

      1.2  动物 中国论文网,kV3r%zo:Y6q

    中国论文网t7~AMa(Sk;T

      昆明种雄性小鼠80只,体质量(20±2)g,长沙市开福区实验动物科技服务部提供,动物合格证号:湘000468。

    X'j0^#dF&?v,j0中国论文网R a#T4w3z

      1.3  仪器与设备

    #\dv;S_,q3B2cY0

    j @;U(Bn]f0  电热恒温干燥箱,202-3AB型,天津市泰斯特仪器有限公司产品;中国论文网/z.o)ta]1sNZW l L9[

    中国论文网3Zo1ETe6wi5a

      电热恒温水浴锅,DK-98—1A,天津市泰斯特仪器有限公司产品;

    8K6E T'Om0

    7\*K @:C"R0  真空旋转蒸发器,RE 52-99,上海亚荣生化仪器厂产品;中国论文网 dd0[#f_:nYv_X

    中国论文网D)|^ H3m%|1dctu

      抽滤机,SHB-B95型,郑州长城科工贸有限公司产品。总胆固醇(TC) 试剂盒,南京建成生物工程研究所产品;  

    *i-zs'\`v0中国论文网kC C([#g"p RI&y

      甘油三酯(TG)试剂盒,南京建成生物工程研究所产品;  中国论文网#g o(@#J`(e

    ]zB'H,cSjZ0  试剂盒,南京建成生物工程研究所产品;  中国论文网c+{Ku`&Z R#z

    中国论文网3o0Wc:s Bg0_q+zg

      高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒,南京建成生物工程研究所产品;  中国论文网CC4k%j'E9q

    中国论文网Ln7ol O"[

      乙醇95%,分析纯AR,长沙安泰精细化工实业有限公司产品; 中国论文网G_1F\b}

    中国论文网1i bQ8aY(Ndl

      离心沉淀机,LXT-II,上海医用分析仪器厂产品; 

    VkZ)e*E.X3y0中国论文网e5z7|,X W hw.q0|)G

      氯仿,GB 682-89,上海山浦化工有限公司产品; 中国论文网L$M-x]VR1_)M

    "s`%p Yy0  正丁醇,HG3-1012-76,上海山浦化工有限公司产品; 

    3A#m6H2NLK?0中国论文网$U/zG`,|X*r

      分析天平,TG328B, 湘仪天平仪器厂产品。中国论文网wA%I:s5m-nn zG

    中国论文网3v+I_aw|F$w A

      2  方法中国论文网{ s.Ep(c\6H9_*|

    中国论文网U b&d;P5w?In?k

      2.1   白首乌多糖的提取和纯化  

    ,[3{3N yG,X cC s:B`-k0中国论文网 y fhj5e;El6K1M1Ji

      采用水提醇沉法提取白首乌多糖。取白首乌粉末于圆底烧瓶中,加入3倍量85%酒精,回流脱脂。将浸提脱脂后的样品,在90℃恒温水浴中热水浸提2 h,过滤后,滤渣在相同条件下重复浸提1次。减压过滤,去除滤渣,合并滤液。将滤液减压浓缩至最小体积。在浓缩后的多糖溶液中加入3倍95%乙醇,经抽滤,真空干燥后得粗多糖。 粗多糖加蒸馏水复溶后经过Sevag试剂(氯仿∶正丁醇=5∶1)除蛋白,连续操作多次,直到完全脱除蛋白为止。脱蛋白后的多糖溶液中加入3倍95%乙醇,沉淀用乙醇、丙酮及乙醚反复洗涤,经抽滤、干燥后得到精制多糖。

    f0{V+F%L/y^n0中国论文网.Tl/i7b1?0|

    M{*T1B+S egK;_!H0 2.2  动物分组及处理实验分为5组,即:正常对照组、高脂对照组、低剂量白首乌多糖组、中剂量白首乌多糖组、高剂量白首乌多糖组。除基础饲料组(正常对照组)外,其它各组均采用高脂饲料(猪油10%,胆固醇5%,基础饲料75%)喂饲。以每天灌胃量为大鼠体重的2%将白首乌多糖配制成相应浓度的溶液,各剂量组给予白首乌的量是:低剂量组50 mg/kg体质量;中剂量组100 mg/kg体质量;高剂量组200 mg/kg体质量。正常对照组和高脂对照组给予相应体积的蒸馏水,实验期为10 d。

    :an(cF)F3f0中国论文网1\ ?[:jbl)sX6|

      2.3   血样采集及预处理

    :zz9^:}ZJg;n n:B Z6b0

    E4[3e,rq K{ ?)O0  喂养结束后,大鼠禁食12 h,摘眼球取血,离心(3 000 r/min,15 min)分离血清,待测。中国论文网-Oq0\{#n7[,Kp

    中国论文网Gc _.i D+BW3I

      2.4   测定指标及方法

    ,K1K+m(e6C*z0中国论文网 O7p,Q nj

      2.4.1  血清总胆固醇(TC)采用酶比色法(CHOD-PAP法)测定。

    'I1Gk8n}1_R:x0中国论文网$m y6gp|9a

      2.4.2  血清甘油三酯(TG)采用酶比色法(GPO-PAP法)测定。

    2MO&i] q0中国论文网 lp y0\W(|;j? d0c

      2.4.3  血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)采用聚乙烯硫酸沉淀法测定。

    ![o8v0@j,a1`0

    -Pr`I-| L0  2.4.4  血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)采用磷酸钨-镁沉淀法测定。采用UV1800紫外分光光度仪测定数据。中国论文网%tbT _3@W#U

    中国论文网(XdR Yo~u

      2.5   实验数据处理实验数据均在LENOVO-compatible PC 机Windows XP系统下采用Excel 2003进行计算和统计学处理,并用T-test来分析组间差异的显著性。结果以±s表示。文字处理软件用Microsoft Word 2003。  中国论文网2Rzz P F&L9}

    中国论文网q2T.J4R,lh V*E

      3  结果中国论文网 O1OXN(x E L
        
    laO3B$pr+T(W0  见表1。由表1可以看出,高脂对照组的TC、TG和LDL-C显著高于正常对照组(P<0.05),而HDL-C无变化 (P>0.05),表示本实验高血脂模型造模成功,说明高脂饲料能够造成小鼠实验性高脂血症;给予低剂量的白首乌多糖对高脂血症大鼠的TG、LDL-C和HDL-C无显著影响(P>0.05),但可以使TC极显著地降低(P<0.01);中剂量白首乌多糖组中,TC、TG和LDL-C均显著低于高脂对照组(P<0.05),HDL-C显著高于高脂对照组(P<0.05);高剂量组能显著降低高脂血症大鼠的TC、TG和LDL-C(P<0.01),并可显著升高HDL-C(P<0.01),且TC及TG与正常对照组之间无显著差异(P>0.05),HDL-C显著高于正常组(P<0.05),但LDL-C值与高脂对照组相比有所降低,可仍显著高于正常对照组(P<0.01)。表1  各组大鼠的血清TG,TC,HDL-C,LDL-C 水平(略)中国论文网4y5x`s~
        中国论文网xN#L)@,W~(`7x C{*f
      由以上结果可知,白首乌多糖具有降低血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白,提高高密度脂蛋白的能力,因此具有降血脂生理活性,可能对高脂血症的发生有一定的预防作用。

    ja[q[0中国论文网 O&gk U'QB.J:Pu

      4  讨论中国论文网F1or?6v2oG?%uU
        中国论文网%w&f,V0N(qB jac
      采用高脂饲料配方喂食大鼠来诱导其高脂血症,实验结果表明,白首乌多糖能显著降低高脂血症大鼠的TC、TG和LDL-C,升高HDL-C,且高剂量组各项指标之间均无明显差异,说明高剂量的白首乌多糖具有降血脂功能,对高脂血症的发生有一定的预防作用。白首乌多糖能够显著提高高脂血症大鼠的HDL-C/TC水平,说明其对冠心病和动脉粥样硬化有一定的预防作用。中国论文网}vAK3[Q5L

    Yb Ng;T*q0【参考文献】
    &d@R[HB!p(l0   [1]赵冰清,张为,周源,等.瑶药白首乌的研究进程[J].时珍国医国药杂志,2006,17(12):6882.
    };UC.veZ1[y0
    9d~;bxcB!QYs0  [2]徐凌川 ,梁传东, 吴明燕,等.白首乌糖类的提取及含量测定[J].山东中医药大学学报,2003,27(5):215.中国论文网h#CM;OWP

    Y CP(W.O1K0  [3]Friedwald WT.Estimation of Conantration of LowDensityLipo protein Cholesterol in Plasma without Use of theReparative Ultracentrifuge[J].Chin Chen,1992,18(3):499.中国论文网 l]3GE#Fsi].^

    Mv ib+Sv;B:u P afh0  [4]饶颖竹,陈蓉,莫锦坚,等.仙人掌对小鼠实验性高血脂症的降脂作用[J].中国康复医学杂志,2004,19(7):523.

    G(jHI{mOt0
    中国论文网j#jiL{!@U2S,e\

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