白首乌多糖降血脂作用研究

【摘要】  目的研究白首乌多糖抗高血脂的药理作用。方法采用水提醇沉法提取，用Sevag试剂(氯仿∶正丁醇=5∶1)除蛋白精制多糖。将80只昆明种小鼠随机分成5组，即正常对照组、高脂对照组(模型组)、白首乌多糖小、中、大剂量组。测定白首乌多糖对血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)以及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响。结果白首乌多糖高剂量组能显著降低高脂血症大鼠的TC、TG和LDL-C(P<0.01)，并可显著升高HDL-C(P<0.01)。结论白首乌多糖具有降低血清总胆固醇、甘油酯和低密度脂蛋白，提高高密度脂蛋白的能力；白首乌多糖具有降血脂功能，对高脂血症的发生有一定的预防作用。

4g%s E0A F6{ w'[0【关键词】  白首乌； 多糖； 高血脂症； 降血脂中国论文网!A1v0W]t(c.Gi

　耳叶牛皮消Cynanchum auriculatum Royle exWight系萝藦科(Asclepiadaceae)马利筋亚科(Ascle-pioideae)鹅绒藤属(Cynanchum linn)植物，又名飞来鹤(《植物名实图考》)，老牛冻(湖南，四川)［1］；在我国资源丰富，山东、江苏有人工栽培，药用其块根；具有补肝肾、强筋骨、益精血、健脾消食、解毒疗疮等功效［1，2］。白首乌总苷对预防动脉粥样硬化斑块形成有一定的意义［3，4］。本实验研究白首乌多糖的降血脂作用。

　　1  器材中国论文网6h&F6vaV2d

b,D-J F6l0　　1.1  药材与试剂本实验所用白首乌购自江苏滨海，经湖南省药检所方石林教授鉴定为萝摩科植物耳叶牛皮消Cynanchum auriculatum Royle ex Wight，实验用酒精（AR），总胆固醇(TC) 试剂盒(南京建成生物工程研究所)，甘油三酯(TG)试剂盒(南京建成生物工程研究所)， 低密度脂蛋白(LDL-C)试剂盒(南京建成生物工程研究所)， 高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。氯仿、丙酮、乙醚、正丁醇均为分析纯。中国论文网FZ4z_4D9\g.c

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N^1a+_ A1z0　　1.2  动物 

　　昆明种雄性小鼠80只,体质量(20±2)g，长沙市开福区实验动物科技服务部提供,动物合格证号：湘000468。中国论文网L"Wv'bTC

　　1.3  仪器与设备中国论文网(k5o7R6Y`"f)~p

m~%E$qpG[L6W9T;d0　　电热恒温干燥箱，202－3AB型，天津市泰斯特仪器有限公司产品；中国论文网`-IZ)[na

　　电热恒温水浴锅，DK－98—1A，天津市泰斯特仪器有限公司产品；

q+Xa(l'MS*w0　　真空旋转蒸发器，RE 52－99，上海亚荣生化仪器厂产品；中国论文网 w_T(a4pI2i6sa

　　抽滤机，SHB－B95型，郑州长城科工贸有限公司产品。总胆固醇(TC) 试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；  

;t*c]mz9A*}.Ffq"G0　　甘油三酯(TG)试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；  

)R!r5a'hS F2Qn0\0　　试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；  

w.{4Y?
{ nu/@0　　高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；  中国论文网1I}Jx*^e#{ dT3^

3I_j[G0　　乙醇95%，分析纯AR，长沙安泰精细化工实业有限公司产品； 

:pa4vx,gg$p0　　离心沉淀机，LXT－II，上海医用分析仪器厂产品； 中国论文网 }7Q9UjY-IZ

&Sm?9pMW
a0　　氯仿，GB 682－89，上海山浦化工有限公司产品； 中国论文网tX+Oa6A9[8u

,}X
u-BraCL0　　正丁醇，HG3－1012－76，上海山浦化工有限公司产品； 

　　分析天平，TG328B， 湘仪天平仪器厂产品。

RX d?6W6cm"@,Zl0　　2  方法

　　2.1   白首乌多糖的提取和纯化  

　　采用水提醇沉法提取白首乌多糖。取白首乌粉末于圆底烧瓶中，加入3倍量85%酒精，回流脱脂。将浸提脱脂后的样品，在90℃恒温水浴中热水浸提2 h，过滤后，滤渣在相同条件下重复浸提1次。减压过滤，去除滤渣，合并滤液。将滤液减压浓缩至最小体积。在浓缩后的多糖溶液中加入3倍95％乙醇，经抽滤，真空干燥后得粗多糖。 粗多糖加蒸馏水复溶后经过Sevag试剂(氯仿∶正丁醇=5∶1)除蛋白，连续操作多次，直到完全脱除蛋白为止。脱蛋白后的多糖溶液中加入3倍95％乙醇，沉淀用乙醇、丙酮及乙醚反复洗涤，经抽滤、干燥后得到精制多糖。

中国论文网[,c,n,J0N'z

　2.2  动物分组及处理实验分为5组，即：正常对照组、高脂对照组、低剂量白首乌多糖组、中剂量白首乌多糖组、高剂量白首乌多糖组。除基础饲料组(正常对照组)外，其它各组均采用高脂饲料(猪油10％，胆固醇5％，基础饲料75％)喂饲。以每天灌胃量为大鼠体重的2％将白首乌多糖配制成相应浓度的溶液，各剂量组给予白首乌的量是：低剂量组50 mg/kg体质量；中剂量组100 mg/kg体质量；高剂量组200 mg/kg体质量。正常对照组和高脂对照组给予相应体积的蒸馏水，实验期为10 d。

　　2.3   血样采集及预处理

"oqR7aJEB5PG0　　喂养结束后，大鼠禁食12 h，摘眼球取血，离心(3 000 r/min，15 min)分离血清，待测。

%hn}&pK$XmR0　　2.4   测定指标及方法

　　2.4.1  血清总胆固醇(TC)采用酶比色法(CHOD-PAP法)测定。中国论文网K/QK)vO4f-Wr_

8K,rZNc8U2d;QC:Y0　　2.4.2  血清甘油三酯(TG)采用酶比色法(GPO-PAP法)测定。中国论文网$ofPF$? Pq6HO+E

n3f[q'g cI0　　2.4.3  血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)采用聚乙烯硫酸沉淀法测定。中国论文网mG.k$SjQ'\

　　2.4.4  血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)采用磷酸钨-镁沉淀法测定。采用UV1800紫外分光光度仪测定数据。

　　2.5   实验数据处理实验数据均在LENOVO-compatible PC 机Windows XP系统下采用Excel 2003进行计算和统计学处理，并用T-test来分析组间差异的显著性。结果以±s表示。文字处理软件用Microsoft Word 2003。  中国论文网6KE7rEo;]w

　　3  结果中国论文网;z*qfjkk\-Y
    
v? ^/E~ |kL0　　见表1。由表1可以看出，高脂对照组的TC、TG和LDL-C显著高于正常对照组(P<0.05)，而HDL-C无变化 (P>0.05)，表示本实验高血脂模型造模成功,说明高脂饲料能够造成小鼠实验性高脂血症；给予低剂量的白首乌多糖对高脂血症大鼠的TG、LDL-C和HDL-C无显著影响(P>0.05)，但可以使TC极显著地降低(P<0.01)；中剂量白首乌多糖组中，TC、TG和LDL-C均显著低于高脂对照组(P<0.05)，HDL-C显著高于高脂对照组(P<0.05)；高剂量组能显著降低高脂血症大鼠的TC、TG和LDL-C(P<0.01)，并可显著升高HDL-C(P<0.01)，且TC及TG与正常对照组之间无显著差异(P>0.05)，HDL-C显著高于正常组(P<0.05)，但LDL-C值与高脂对照组相比有所降低，可仍显著高于正常对照组(P<0.01)。表1  各组大鼠的血清TG，TC，HDL-C，LDL-C 水平（略）
uE-Rd)YS0    
rbwz$W$M&G raL/my0　　由以上结果可知，白首乌多糖具有降低血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白，提高高密度脂蛋白的能力，因此具有降血脂生理活性，可能对高脂血症的发生有一定的预防作用。中国论文网FwoQRF5^0MH+S \

　　4  讨论
I.j5vc(o-O7`N J,N/l0    
| oG0[w1Vf0　　采用高脂饲料配方喂食大鼠来诱导其高脂血症，实验结果表明，白首乌多糖能显著降低高脂血症大鼠的TC、TG和LDL-C，升高HDL-C，且高剂量组各项指标之间均无明显差异，说明高剂量的白首乌多糖具有降血脂功能，对高脂血症的发生有一定的预防作用。白首乌多糖能够显著提高高脂血症大鼠的HDL-C／TC水平，说明其对冠心病和动脉粥样硬化有一定的预防作用。中国论文网Z r*l g3kMy

【参考文献】中国论文网+p6^ee!~G'k
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,|P&i,JCTrII0　　［2］徐凌川 ，梁传东， 吴明燕，等.白首乌糖类的提取及含量测定［J］.山东中医药大学学报，2003，27（5）：215.中国论文网A[}5r0Ac

.sD~#E\ SHsH0　　［3］Friedwald WT．Estimation of Conantration of LowDensityLipo protein Cholesterol in Plasma without Use of theReparative Ultracentrifuge［J］.Chin Chen，1992，18(3)：499．
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　　［4］饶颖竹，陈蓉，莫锦坚，等．仙人掌对小鼠实验性高血脂症的降脂作用［J］.中国康复医学杂志，2004，19(7)：523．