尿纤溶酶原激活物在乳腺良恶性组织中的表达及意义

【摘要】  目的：研究乳腺良恶性组织中尿纤溶酶原激活物(uPA)的表达及临床意义。方法：采集乳腺腺瘤23例，乳腺癌109例，利用免疫组织化学方法检测uPA的表达情况。结果：uPA在乳腺癌和乳腺腺瘤中表达率分别为49.54%和21.73%，两组差异有显著性(P<0.05)。浸润性癌组阳性率高于非浸润性癌组(P<0.05)，髓样癌组高于浸润性导管癌组(P<0.05)，有淋巴结转移组阳性率高于无转移组，差异有显著性 (P<0.05)。结论：uPA阳性率与患者病理类型及有无淋巴结转移有关。检测uPA在乳腺癌中表达，可以提示预后并对肿瘤的治疗方案选择有指导作用。中国论文网'g@E1n'p'ikh V
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【关键词】  乳腺肿瘤;腺瘤;尿纤溶酶原激活物;免疫组织化学中国论文网[3N3n1BZ.F6w
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　　【ABSTRACT】 Objective:To investigate the significance of urinary plasminogen activator expression in adenoma and cancer of breast.Methods:uPA was deteced by immunohistochemistry in 109 cases with breast cancer and 23 cases with adenoma.Results:The positive rates of uPA were 49.54%(54/109) and 21.73%(5/23) respectively in breast ancer and adenoma.The positive rates of infiltrating cancer were higher than that of non?invasive carcinoma(P<0.05),the positive rates of medullary carcinoma was higher than that of infitrating ductal carcinoma(P<0.05),the positive rates of lymphatic metastasis were higher than that of Lymph nodes without moving(P<0.05).Conclusion:The positive rates of uPA were associated with age,pathology type and lymph node metastasis.The detemination of uPA might be useful for estimating prognosis and treating breast cancer.中国论文网[6@P^8l0?_N

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h#]#?7kE0　　【KEY WORDS】 Breast Neoplasms,Adenoma,Urinary plasminogen activator,Immunohistochemistry
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　　尿纤溶酶原激活物(urinary plasminogen activator,uPA)是一种丝氨酸蛋白水解酶。近年来人们发现uPA的高表达与肿瘤的侵袭和转移有着密切的关系，由于肿瘤细胞能够通过自身分泌的uPA降解基底膜和细胞外基质，破坏其自然屏障作用，从而侵袭周围组织。本研究旨在探讨uPA的表达与乳腺癌病理特性之间的关系及其在肿瘤转移过程中的作用，从而评估乳腺癌生物学行为和寻找治疗乳腺癌的新途径。中国论文网 Xyd+e.d]2C"kA(o:?#C^
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　　1 资料与方法
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~j2_ J E0　　1.1 一般资料 收集张家口市三所市级医院2003—2007年间乳腺癌手术切除标本109例，乳腺腺瘤23例，全部为女性患者。乳腺癌患者年龄25～79岁，平均年龄49.61岁，中位年龄50岁;乳腺腺瘤患者年龄21～59岁，平均年龄36.87岁，中位年龄38岁。术前均未接受放化疗。中国论文网6\4Ft&F#Mm(}z
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　　1.2 方法和试剂
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　　鼠抗人uPA血清、SP免疫组化试剂盒及DAB显色剂购自北京中杉金桥生物公司。
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　　按常规将新鲜标本用10%中性甲醛固定24h，石蜡包埋，切片厚度5μm。染色程序按照SP组织化学试剂盒规程进行。阳性对照为已知肺癌切片，阴性对照以PBS替代第Ⅰ抗体。
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d@6r*R"\:G.|Gy)RZ0　　1.3 结果判定 高倍镜下(×400)取10个视野，凡uPA阳性细胞(细胞膜和细胞质呈棕黄色)占10%以上者为阳性病例，阳性细胞少于10%为阴性病例。中国论文网P5k]-B8_6G5K+|i
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　　1.4 统计学方法 组间比较采用χ2检验,P<0.05为组间差异有显著性。
*v!tf r*O5B \h02 结果中国论文网{sl ]{1JBX!l]
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　　免疫组化染色结果显示,uPA阳性着色在癌细胞膜和细胞质内呈棕黄色颗粒,均一弥漫性分布,uPA在乳腺瘤和乳腺癌中阳性率分别为21.73% 和49.54%两者差异有显著性(P<0.05)。uPA表达与年龄和发病部位的关系见表1，与病理类型的关系见表2。表1 uPA在良恶性乳腺肿瘤表达与生物学特性的关系注：与乳腺腺病组相比▲P<0.05表2 uPA表达与乳癌病理类型及转移的相关性注：与浸润小叶癌组相比※P<0.05;与髓样癌组相比△P<0.05;与无淋巴结转移组相比 ▲P<0.05中国论文网zj8v]LG

jIoz2F9RCR0　　3 讨论中国论文网rd#xOQ"}w
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　　乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，发病率呈逐年上升趋势，其死亡率与癌细胞的侵袭、转移密切相关。而侵袭和转移又是恶性肿瘤的重要生物学特征，有研究表明肿瘤细胞的侵袭和转移是一个多步骤，多环节的复杂过程[1]，其中最重要的一步就是必须穿透一系列的天然组织屏障——基底膜和细胞外基质。而正常基底膜是均一的、连续的结构，由Ⅳ型胶原形成三维网状骨架，上面连接着层粘蛋白(LN)，纤维连接蛋白(EN)等多种糖蛋白成分，正常情况下是不允许任何上皮细胞穿透的，仅在其发生病变或破坏时细胞才能越过基底膜。目前研究表明能有效降解细胞外基质的酶类是包括脯酞酶、丝氨酸蛋白酶等在内的六大酶系，其中uPA属于丝氨酸蛋白酶类。肿瘤细胞分泌的uPA是尿激酶原激活物(pro?uPA)，pro?uPA是活性很低的单链酶原结构，其与细胞膜上的特异性受体(uPA?R)结合而被激活，被激活的uPA可以活化胶原酶，该酶对基质胶原纤维进行分解，同时被激活的uPA也可以直接降解基底膜和细胞外基质成分，为癌细胞迁移创造条件，因此uPA在肿瘤的侵袭和转移中具有重要作用。

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　　uPA基因定位于10号染色体(10q24)，基因名称为PLAU，含有11个外显子和10个内含子，长度6.5kb。基因编码蛋白质uPA是一种含有411个氨基酸残基的丝氨酸蛋白水解酶[2],在正常组织中表达很低,Lotti等[3]和watanabe等[4]报道在机体损伤时uPA可促进细胞移动，皮肤创伤愈合及表皮再生。而在乳腺癌中黄晓曦等[5]研究结果显示uPA抗原高于乳腺良性组织中uPA的水平，并且与肿瘤的侵袭和转移及预后不良有密切联系，本实验也证实了这一点。另外我们的研究也表明：非浸润性癌组uPA阳性率明显低于浸润性癌组(P<0.05),典型髓样癌组和浸润性导管癌组的表达率差别也很大(P<0.05)，说明其生物学特征行为与特定病理类型有一定的相关性。学术论文发表
7H;IP ]ze3{)a;p0中国论文网3d}D&I)x(E
　　近年来国内外对uPA的研究结果显示，uPA与癌症的浸润和转移存在相关性[6，7],我们的实验也发现乳腺癌组织中uPA的阳性表达率与年龄、位置无关，与肿瘤有无淋巴结转移密切相关，淋巴结转移组阳性率为58.57%，无淋巴结转移组阳性率为33.33%，差异有显著性 (P<0.05)，这表明uPA在肿瘤的侵袭和转移中起了促进作用，提示检测uPA有助于判断乳腺癌的生物学行为，在临床上可能成为判断预后的指标之一。
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　　多种uPA合成抑制剂能够抑制uPA的表达从而抑制肿瘤的侵袭和转移，并且在肿瘤的治疗中取得了一定的效果[8]。我们相信随着uPA的深入研究将阐明其调控机制和作用机制，有利于人们对乳腺癌的防治以取得更好的疗效。
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